细胞被污染
⑴ 细胞被污染了,但是没有死,还能用么
应该不是细菌污染,有其他污染吧,比如支原体等。洗了之后也不能去掉污染,内刚开始状态容好是因为污染物没有大量生长,以至于观察不到,看上去细胞状态也没受影响,之后越长越多逐渐影响细胞生长直至死亡。
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⑵ 细胞污染了,实验室怎么办
细胞污染了,应立即和其他细胞分开。采用人机料法环的分析方法,全面排查原因。实验室可以采用终末消毒技术对环境和设备彻底的大消毒。终末消毒技术可以对环境和设备一起消毒,比如培养箱,显微镜等。
⑶ 细胞培养,被污染
细胞污染? 细胞产品专家齐氏生物建议您先搞清楚污染的原因
1)细菌(会出现培养液变混浊,pH改变,污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,最后变圆脱落死亡,造成试验失败和细胞株丢失。)
2)真菌(可见培养液中漂浮着白色或浅黄色的小点,有的散在生长,培养液一般不发生混浊;倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中,有的呈链状排列。)
3)支原体(部分敏感细胞可见细胞生长增殖变慢,部分细胞变圆,从瓶壁脱落。但多数细胞污染后无明显变化,或略有变化,若不及时处理,还会产生交叉污染。 )
可以从组织清洗、实验室环境灭菌、无菌操作规范等几个方向查找一下原因。
⑷ 细胞被虫子污染怎么处理
一、.食品污染按污染源的性质:生物性污染、化学性污染、放射性污染。(1)生物性污染食品的生物性污染包括微生物、寄生虫和昆虫的污染、有毒生物组织污染、昆虫污染,主要以微生物污染为主,危害较大,主要为细菌和细菌毒素、霉菌和霉菌毒素。(2)化学性污染来源复杂,种类繁多。主要有:①来自生产、生活和环境中的污染物,如农药、有害金属、多环芳烃化合物、N-亚硝基化合物、二恶英等。②从生产加工、运输、储存和销售工具、容器、包装材料及涂料等溶入食品中的原料材质、单体及助剂等物质。③在食品加工储存中产生的物质,如酒类中有害的醇类、醛类等。④滥用食品添加剂等。(3)放射性污染环境中人为的放射性核素污染主要来源于以下几个方面:核爆炸、核废物的排放、意外事故。环境中的放射性核素可通过食物链向食品中转移,其主要的转移途径有:向水生生物体内转移、向植物转移、向动物转移。食品放射性污染对人体的危害:摄入污染食品后放射性物质对人体内各种组织、器官和细胞产生的低剂量长期内照射效应。主要表现为对免疫系统、生殖系统的损伤和致癌、致畸、致突变作用。二.食品污染的途径1.内源性污染(1)内源性污染(2)内源性生物性污染:畜禽生前感染人兽共患病.(肉,蛋,乳被污染);畜禽生前感染固有疾病,抵抗力下降引起继发性感染。;畜禽生活期间带染某些微生物,畜禽抵抗力下降引起这些微生物浸入肌肉,肝脏等部位,造成肉品污染。(3)内源性化学污染(4)内源性放射性污染2.外源性污染外源性生物性污染:食品在加工,运输,储藏,销售,烹饪等过程中由于不遵守操作规程,使起受到微生物等的污染.主要有(1)通过水的污染(2)通过空气的污染(3)通过土壤的污染(4)生产加工过程的污染(5)运输/保藏过程的污染(6)病媒害虫的污染外源性化学性污染:食品在加工、运输、储藏、销售、烹饪等过程中受到有毒害化学物质的污染。主要有:(1)空气(2)水(3)土壤4)运输(5)生产加工
⑸ 我的细胞被污染了么
你想知道是哪种细菌我无能为力。不过有些事情可以建议你。
首先,41℃不知道是你哪里的出来的灭菌方式,要灭菌都是121℃下20分钟以上才行。
要分析哪里污染可以按照步骤来,首先,考虑培养基。取样培养基,在37°培养箱中做无菌试验,看看培养基有问题没。接着,换一批培养瓶,枪头。
因为我不知道你的实验条件怎么样,比如说枪头是灭菌的还是一次性包装中的吸量管,使用的方瓶是反复灭菌的玻璃方瓶还是一次性塑料方瓶。用的是生物安全柜还是超净台等等。这些都是有区别的。我猜你染这种菌,应该是用的超净台,玻璃方瓶,以及灭菌的枪头是吧。
⑹ 大家帮忙看看细胞有没有被污染
细胞污染复很多种,不同种细胞污制染表现不同,可能检测方法不同。不过大部分污染用肉眼加镜检就可以解决。
细胞污染一般分细菌污染,真菌污染,支原体污染,黑胶虫等。
细菌污染:pH升高培养基变黄,培养基严重浑浊,镜下可见细菌游动;
真菌污染:培养液短期内多不浑浊,有肉眼可见漂浮物,镜下细胞间有菌丝体,生长变慢,时间长细胞死亡;
支原体污染:细胞生长一般无可见变化,可用支原体检测试剂盒检测支原体污染(现在市场上有卖,有检测支原体DNA的,灵敏度高但过程复杂;非检测DNA的过程简单)
黑胶虫:培养液不浑浊,细胞生长影响不大,镜下有小黑点做布朗运动;
⑺ 细胞转染时遭遇细胞污染怎么办
腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒,目前因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。构建重组AAV(rAAV)涉及到用一个目的基因替换病毒基因组的大部分,然后将这个重组基因组包装到一个有感染性的病毒颗粒里。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。此方法的局限性包括(1) Ad辅助病毒污染rAAV,(2)rAAV的低产出,(3)生成有复制能力的AAV。在此我们描述了新的辅助质粒(pH3和pH5),排除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AAV的rep和cap基因和Ad E2A、VAI和E4基因。当辅助质粒在没有Ad感染的情况下共转染到人293细胞中,rAAV载体产量超过了pAAV/Ad包装质粒的80倍。另外,有复制能力的AAV在rAAV制备过程中少于0.00125%。此系统的主要优点是(1)无需感染性的腺病毒(2)只使用两个质粒就提高了转染效率和载体的产出。我们相信该双质粒转染系统因其简便性和高产出而使AAV载体系统能被更广泛地使用。该系统尤其将对多rAAV载体的临床前分析有用。
⑻ 困惑:细胞及培养基是被细菌污染了吗
细胞培养中常见的污染情况总结如下:
1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理
2、霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。 CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用过氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。 其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。
预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞。,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作
3、支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。
4、黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率。
5、真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。
真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
6、原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环。
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等
关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长 就是操作的问题。
也可以在培养基中事先加入双抗(硫酸链霉素和氨苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状
态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。
1、孵箱应定期用三氧机消毒 或者 紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水
2、超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素
3、超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染
4、无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水喷洒中和,约几小时即可进入操作。