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dna污染

发布时间: 2020-11-22 12:32:18

㈠ 如何预防PCR实验的DNA污染

PCR实验防止污染的方法:
进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。
划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:
1. 试剂准备区。
2.标本制备区。
3. PCR扩增区及分析区。
切记:任何一间的产物及器材不要拿到其他两个工作区。
分装试剂:PCR扩增所需要的试剂均应在生物安全柜、装有紫外灯的超净工作台或负压工作台配制和分装。所有的加样器和吸头需固定放于其中,不能用来吸取扩增后的DNA和其他来源的DNA:
1.PCR用水应为高压的双蒸水;
2.引物和dNTP用高压的双蒸水在无PCR扩增产物区配制;
3.引物和dNTP应分装储存,分装时应标明时间,以备发生污染时查找原因。
实验操作注意事项
尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因,样品间的交叉污染也是原因之一。因此,不仅要在进行扩增反应是谨慎认真,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意:
1. 戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套;
2. 使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染;
3. 避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面;
4. 操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的精确度;
5. 最后加入反应模板,加入后盖紧反应管;
6. 操作时设立阴阳性对照和空白对照,即可验证PCR反应的可靠性,又可以协助判断扩增系统的可信性;
7. 尽可能用可替换或可高压处理的加样器,由于加样器最容易受产物气溶胶或标本DNA的污染,最好使用可替换或高压处理的加样器。如没有这种特殊的加样器,至少PCR操作过程中加样器应该专用,不能交叉使用,尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个区;
8. 重复实验,验证结果,慎下结论

㈡ 被污染的样本可以做DNA吗

从技术上,微量的或者污染的DNA(极端或者特殊情况不包括在内)是可以得到数据的,比如在刑侦等事件上。但对于我们普通的运用,DNA样本就要保证准确无污染,如果不符合条件就有做不出来的可能(要么做不出来,但是不存在错误的情况),如果提供不符合常规样本的特殊样本,那么在收费等方面可能就会有很大的差别,具体应咨询鉴定机构

㈢ 什么是基因组DNA污染

什么是基因组DNA污染
基因组,Genome,一个细胞或者生物体所携带的一套完整的单倍体版序列,权包括全套基因和间隔序列。
可是基因组测序的结果发现基因编码序列只占整个基因组序列的很小一部分。因此,基因组应该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子。说的更确切些,核基因组是单倍体细胞核内的全部 DNA分子。线粒体基因组则是一个线粒体所包含的全部DNA分子。叶绿体基因组则是一个叶绿体所包含的全部DNA分子。

㈣ 如何去除RNA中的DNA污染

这个如果你做反转录的话,只能是用PCR检测了。电泳基本检测不出来。象现在的试剂盒或者TRIZOL提的RNA,除质量太差,一般含基因组很少。 如果RT-PCR发现结果不对,可以用那种不含RNA酶的DNA酶处理一下。 如果引物能避开的话,有点DNA也没关系。

㈤ 进行紫外线照射可以除去dna污染吗

紫外线主要是通过对微生物(细菌、病毒、芽孢等病原体)
的辐射损伤和破坏核酸的功内能使微生物致死,从容而达到消毒的目的。紫外线对核酸的作用可导致键和链的断裂、股间交联和形成光化产物等,从而改变了DNA的生物活性,使微生物自身不能复制,这种紫外线损伤也是致死性损伤。所以要防止DNA对qPCR的污染,除了是去除环境微生物,另外要注意1、气溶胶;2.实验过程中各种耗材对待测样本的接触污染。

㈥ 什么是基因污染

基因污染已经抄越来越受到人类袭的重视,被视为非常恐怖的污染。什么是基因污染呢?就是指一些未知的外源基因通过转基因作物或家养的动物,扩散到栽培作物或野生物种,然后成为后者基因的一部分,这种现象称为基因污染。

基因污染主要是由基因重组引起的。一旦出现基因污染,将很难改观,甚至会越来越严重。基因工程作物中的转基因能通过花粉所进行的有性生殖过程扩散到其他的同类作物上,这种过程称为“基因漂散”。

㈦ 为什么我提的RNA总有DNA污染

如果污染基因组DNA的话,
由于基因组DNA分子量大,电泳特别慢,
因此通常会在加样孔周围看到EB强染信号.

㈧ 如果提取的质粒DNA污染有少量染色体DNA,你们在操作过程中哪既不最可能出现问题

.

加入裂解液的时候颠倒混匀的动作幅度太大,
会导致基因组DNA断裂成小片段,和质粒混在版一起。

沉淀以后,吸取上清液权的时候不小心吸入沉淀,
会把夹在沉淀中的基因组DNA也一起吸入硅胶吸附柱,
这一步的可能性更大,通常都是这一步混入的基因组DNA。

.

㈨ 如何预防PCR实验的DNA污染

首先,rna不能用于pcr扩增的模板,因此有rna污染的dna不会影响扩增;其次,rt-pcr指的是从rna反转录成dna再进行扩增的过程,因此,不存在rna污染dna的说法,只有后者污染前者的说法。

㈩ 如何在RTPCR过程中避免DNA污染

首先,从引物设计上避免基因组DNA的扩展,设计引物的时候扩展的区域在两个不同专的外显子上,这样的属话中间有一个内含子,如果PCR扩增的时候将基因组DNA也扩增出来的话,电泳条带长度会比目地带长
另外,提取好RNA之后,可以加入DNA酶进行消化,这样可以消除RNA模板中的基因组DNA污染,TAKARA公司有卖的.
做到以上两点基本可以保证没有基因组DNA的干扰了

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