污染提取

㈠ 有什么办法可以从重金属污染的土壤中把重金属提取出来，谢谢！

土壤条件与重金属的迁移转化
不同土壤条件下(土壤类型、土地利用方式、土壤物化性状、酸碱性、氧化––还原、吸附、络合)的影响，可引起土壤中重金属元素存在形态的差异，从而影响重金属的迁移和作物对重金属的吸收。
(1)氧化–––还原条件。土壤的这一体系是一个由众多无机和有机的单项氧化–––还原体系组成的复杂体系。
无机体系：O2、Fe、S、H2体系，由决定电位体系控制，其中O2–H2O体系和硫体、H2体系作用明显，对重金属元素价态变化起重要作用。
①O2–H2O体系：
25℃时，Eh=1.23+0.015lgPo2-0.059pH
②H2体系，旱地土壤中少见，淹水状态下，为还原强烈的土层中：有H2积累
25℃时，Eh=0.059pH
以上两体系为土壤氧化––还原体系的两个极端，土壤中其他体系介于二者之间。所以这两个体系为上限和下限。
重金属元素按其性质分为氧化难溶性(氧化固定元素–––Fe3+、Mn4+等，和还原难溶性(还原固定)元素––Cd、Cu、Zn、Cr等(Cd、Zn、Cu、Pb、Ni等生成难溶性化物沉淀)。
在水中：
另外，氧化还原条件的改变，还原使重金属的毒性发生变化，如Cr3+氧化条件下成为Cr6+，其毒性大于Cr3+；As在还原条件下生成亚砷酸，毒性大于砷酸。

㈡ 怎样避免质粒提取基因组DNA污染

1. 加溶液2后不要来剧烈摇晃，溶液2处理源时间不能太久，一般颠倒6-8次即加溶液3中和，这都是为了避免碱裂解基因组；

2. 加溶液3后要混合充分，离心后取上清小心不要吸到白色沉淀，那里有组蛋白包着的基因组DNA。

脱氧核糖核酸（英语：Deoxyribonucleic acid，缩写为DNA）又称去氧核糖核酸，是一种分子，双链结构，由脱氧核糖核苷酸（成分为：脱氧核糖及四种含氮碱基）组成。可组成遗传指令，引导生物发育与生命机能运作。

主要功能是长期性的资讯储存，可比喻为“蓝图”或“食谱”。其中包含的指令，是建构细胞内其他的化合物，如蛋白质与RNA所需。

带有遗传讯息的DNA片段称为基因，其他的DNA序列，有些直接以自身构造发挥作用，有些则参与调控遗传讯息的表现。

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㈢ RNA提取过程中如何去除DNA污染

方法：
1、使用DNA酶DNAse I 消化1小时，恒温37度。
2、离心取上清的时候，一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。
3、直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,离心后的上清液就不含有DNA了。

㈣ 怎么样在RNA提取时避免基因组的污染

260/280的比值可以复判断比较严重制的基因组污染。
也可以通过跑琼脂糖胶看加样孔里亮不亮作为一个参考依据。
其实一般很难保证RNA没有基因组污染的，特别是加入氯仿后的剧烈震荡会促进dna溶解到水相里，后面就很难分离了。
有些许的基因组污染的样品也能够满足大部分的实验要求。
所以在rt-pcr等试验中才要求设计的引物要跨intron，这样就可以区分扩增产物的模板来自于mRNA还是基因组dna

㈤ TRIzol法提取RNA如何避免DNA污染

植物RNA本来就比价难提取,TRIzol提取时裂解要充分 剧烈震荡,分层静置,离心之后版自然就分为两层,取RNA层的时权候吸取一定要小心,吸得时候一定要缓慢,不要怕浪费,有的人吸得很多,很怕浪费,结果就吸到了中间层和下层,个人觉得吸取80%最多了,再多就很容易吸到杂质了,操作要小心,动作快速准却,这样才能提到高质量的RNA

㈥ 试剂盒提取dna,rna污染

仅仅260/280大于1.9并不能说明有RNA污染，1.8到2.0之间应该都是正常的。要确定有没有RNA污染，可以跑胶检测，污染的RNA会形成一个拖带。不放心可以加一点RNA酶。

㈦ 大家好！请教大家一件事：本人想从有毒污染水中提取蒸馏水（煮沸蒸发后）作为饮用水，请问蒸馏水还会有毒

这不好说，要看污染物的性质，如果是重金属盐，过滤是没用的，但蒸馏可以。如内果残留容苯，硝基苯这类有机物，过滤，蒸馏恐怕都够呛，可以试试活性炭吸附。如果是水里有放射性辐射残留，那就没有必要蒸馏或过滤了，因为放射性污染在你接近污染源的时候就已经在危害你了。
另外，“有辐射”，这种说法恐怕是民间用语，专业人士一般具体说“放射性辐射”、“电磁波辐射”等更为准确的说法。

㈧ 提取RNA时如何去除DNA的污染

提取RNA时如何去除DNA的污染的方法：

1. 注意实验室的标准化问题，注意污染的存在，同时严格按照说明书上的操作应该没有

2. 问题。发现DNA污染，用DNAse I 消化1小时，37度

3. 离心取上清的时候，一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。

4. 直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,离心后的上清液就不含有DNA了。

RNA提取步骤：

1. 匀浆处理：

①组织 将组织在液氮中磨碎，每50-100mg组织加入1ml TRIzol，用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10%。

②单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。

③细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。

2. 将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。

3. 可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。

4. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。

5. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60%。

6. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。

7. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。

8. 用75%乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75%乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。

9. 室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟即可。不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5%SDS，用枪头吸打几次，55-60℃放置10分钟使RNA溶解。如RNA用于酶切反应，勿使用SDS溶液。RNA也可用100%的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。

注意事项：

1. 从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。

2. 匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。

3. 分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。

   预期产量：1mg组织或1×106细胞提取RNA分别为：

   肝和脾6-10μg，肾3-4μg，骨骼肌和脑组织1-1.5μg，胎盘1-4μg，上皮细胞8-15μg，成纤维细胞5-7μg 。

㈨ 花粉液提取过程对环境有污染吗

污染还是相对较小的。但是提取后的清洗，残渣，人工生活的污水还是要考虑的。具体看规模，看地域要求。

㈩ RNA提取过程中如何去除DNA污染

直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌，然后离心就可以了。因为RNA可溶于NaOH溶液，而DNA不可溶，离心后的上清液就不含有DNA了。