封口膜被污染

❶ 植物組織培養中哪些因素可導致污染的發生

污染原因1.1
外植體
①年齡、種類和大小。成年植株帶菌多；生理年齡老的材料帶菌多；雜菌和內生菌多的外植體、有病蟲害的植株，均易污染；室外生長的材料帶菌多；表面有泥土的材料、地下器官均帶菌多；表面積大的材料比表面積小的材料帶菌多[1-2]。
②取材時期和部位。雨季菌類繁殖旺盛，此時材料帶菌多；陽光最強時紫外線較強，殺菌效果好，此時材料帶菌較少；選取了不清潔、生長不旺盛部位的材料帶菌多[1]。
③滅菌效果。外植體滅菌是組織培養的關鍵，滅菌效果直接決定了組織培養的成敗，滅菌方法和滅菌劑處理不當導致滅菌效果差，使外植體帶菌。1.2
組織培養過程中各技術環節操作不規范①培養基。使用長菌的母液配製培養基；培養
基pH值高、添加的有機成分均可導致細菌污染；培養基分裝好後沒有及時封口或封口後沒有立即滅菌；培養容器口沒有封嚴導致滅菌後細菌和真菌孢子再次進入培養容器使培養基污染；封口用的塑料蓋、封口膜長時間在日光燈照射下易老化、破裂，導緻密封性差，不慎使用後可能導致培養基污染；橡皮筋長時間在日光燈照射下也易松動、斷裂，雜菌可能趁機進入培養容器；滅菌方法不當導致培養基污染；滅菌時間過短導致培養基滅菌不徹底；滅菌時間達到後立即打開滅菌鍋，導致容器內壓力差過大，使外部雜菌有可能被倒吸入容器中[1]；過濾較多溶液後，濾膜過濾效果較差，使過濾後的溶液有菌，加入培養基後造成污染。
②培養容器和接種器具。培養容器不清潔；培養容器被污染後滅菌不徹底，再次使用時導致污染；高壓滅菌鍋或烘箱內培養容器、接種器具裝得過滿，影響滅菌效果；培養容器、接種器具滅菌時間過短導致滅菌不徹底；滅菌結束後立即打開高壓滅菌鍋或烘箱，強烈的冷熱對流會導致冷空氣被吸入包紮層內而重新造成污染帶菌[1]。
③接種人員。過長指甲；雙手未清洗干凈；衣服和頭發有很多灰塵，接種時不換拖鞋、接種服、帽子和口罩；不慎將已污染的培養材料拿入超凈工作台，轉接後再次污染；培養容器中接種的培養物過多；超凈工作台上物品擺放過多、過高使氣流被擋住，導致滅菌效果差；接種時說話或咳嗽會呼出大量細菌；操作時手超出工作檯面；手接觸培養容器邊緣，放在器皿、接種器械上方致使微生物落入培養容器中；打開培養容器的塞子、蓋或封口膜時空氣進入帶來灰塵；接種過程中器械被手或帶菌材料污染後未經消毒，再次使用後又污染了材料；沒有在超凈工作台下風方向操作而使菌類隨風飄落到容器中[3]；中途離開超凈工作台後馬上又繼續接種，將培養基、器械等物品拿入超凈工作台繼續接種而帶入灰塵，順風飄入器皿。服裝、帽子、口罩、拖鞋長期穿戴後較臟，表面有大量灰塵，未經清洗反復穿戴後造成污染。
④接種室和培養室。人員的進出導致接種室和培養室空氣中存在大量細菌和真菌，尤其是接種過程中非工作人員的進出；接種室設計不合理，造成室內灰塵、細菌過多；超凈工作台置於灰塵太多的地方，過濾裝置使用過久、保養不當造成失效；組培室、接種室門窗封閉不嚴，蒼蠅等趁機飛入，利於雜菌傳播；培養室面積大易污染，室內溫度高、空氣濕度大，菌類繁殖旺盛也會加重污染

❷ 封口膜膜、紙分離了還能不能防菌污染

封口膜只是輔助工具，並不直接接觸無菌樣品，一般用於封存培養皿、EP管、血清瓶等等，都不會接觸到無菌的樣品，所以略帶有雜菌也沒有關系。
你如果實在怕雜菌，可以用75%酒精噴噴，放超凈台中晾乾。

❸ 連續多次製作的MS培養基滅菌三四天後就會發現被污染了，請求哪位專家幫忙看看是什麼原因，謝謝。

你們這做實驗的連封口膜都不用，不會污染才怪呢。本來培養基這東西放置不用的話就用保鮮膜包好放到無菌室里，就這有時候還有污染的。你們這什麼措施都沒有啊。

❹ 封口膜,杯邊邊太多了怎麼辦

封口膜杯邊邊太多的話，這個邊太多，可以進行裁剪一部分，或者的話，選擇合適的封口膜

❺ 培養基忘了用封口膜封上怎麼辦

趕緊封上，培養幾天，看看長沒長菌。

❻ 為什麼在PDA上接種真菌時在培養皿邊緣總是污染不明細菌

如果只是抄在邊緣的話襲，我懷疑是你的平皿蓋的問題。
應該是鋪完PDA後，冷卻的時候冷凝水凝集在平皿蓋上，收取的時候，冷卻水沿著平皿邊緣跑到培養基邊緣。
或者就是平皿蓋不嚴實，加上有冷凝水，那也容易帶細菌進去。
其他可能性也有，做實驗嘛，總有意想不到的。就是操作中，空平皿滅菌的時候需要包嚴實，有條件的話盡量用一次性平皿，無菌操作有超凈台，就用超凈台，學校里的學生實驗往往都只是一個酒精燈。培養基冷卻完，蓋好蓋子，最好用封口膜封口，4℃保存。無菌接種的時候手及手套盡量消毒。我能想到就這些，祝你實驗順利。

❼ 培養滅完菌發現報的封口膜被沖開了，能被污染嗎

應該是瓊脂在高溫下被酸水解了，可以試試單用瓊脂加酸加熱就知道了。其實鹽酸的話本身不太易染菌，滅完培養基再加鹽酸估計問題不大。如果是嚴要求比較高就知道分開滅菌然後再混合了。

❽ parafilm m-996封口膜透氣嗎

主要是避免污染的。不然孢子可能飄進去~~~都要纏的。 我是做植物的，大專腸桿菌是兼性厭氧，農屬桿菌是好氧的，以及組培的我們都是纏了的。封口膜是由透氣性的~~~不過我不知道你用的是什麼膜~~~ ps：我們用得parafilm膜~~~

❾ 細胞培養液沒用封口膜封口會污染嗎

有很大的可能會污染，所以在做細胞培養的時候最好使用封口膜。

封口膜主要特點在於密封性能效果好，防止產品內容物揮發以及污染。