細胞真菌污染

㈠ 細胞或真菌污染的液體進入體內多久會引起嚴

細胞培養物污染往往是細胞培養實驗室最常遇到的問題,有時會帶來十分嚴重的後果.細胞培養污染物主要分為兩類,一類是化學污染物,例如：培養基、血清和水中的雜質、內毒素、增塑劑和去污劑,另一類是生物污染物,例如：細菌、黴菌、酵母、病毒、支原體以及其他細胞系的交叉污染.盡管無法徹底消除污染,但是可以通過充分了解污染源以及採用良好的無菌技術,降低污染發生的頻率和嚴重程度.細菌是一大類廣泛存在的單細胞微生物.細菌直徑一般為幾個微米,外形多樣,例如：球狀、桿狀和螺旋狀.細菌由於分布廣泛、生長迅速以及體積大小的特點,與酵母和黴菌一起構成了細胞培養中最常遇到的生污染物.培養物被細菌污染後,幾天內即可通過簡單的肉眼觀察發現；被感染的培養物通常呈雲霧狀(即：渾濁狀),有時表面會覆蓋一層薄膜.另外,經常還會發現培養基的pH值突然降低.在低倍顯微鏡下可見,細菌為細胞之間移動的微小顆粒,在高倍顯微鏡下觀察可以分辨出各個細菌的形狀.酵母是真菌界的一種單細胞真核微生物,大小從數微米(多見)到40微米(罕見)不等.與細菌污染類似,培養物被酵母污染後也會變得渾濁,特別是進入污染後期時.培養物被酵母污染後pH值變化極小,污染嚴重時pH值才會升高.在顯微鏡下,酵母呈單個卵圓形或球形顆粒,有些會芽生出較小的顆粒.黴菌是真菌界的一種真核微生物,以被稱為菌絲的多細胞絲狀體形式生長.這些多細胞絲狀體構成的交聯網路含有遺傳性相同的細胞核,被稱為集落或者菌絲體.與酵母污染類似,黴菌污染初期培養物pH值會維持穩定,污染加重後pH值會迅速升高,導致培養物渾濁.在顯微鏡下,菌絲體通常呈細束狀纖維,有時呈較為密集的孢子團塊.許多種黴菌的孢子在休眠期均可耐受極端嚴峻、不利的環境,當其遇到合適的生長條件時才會被活化.病毒是一種微觀感染性物質,利用宿主細胞結構進行復制.病毒體積極小,因而要檢測培養物中有無病毒以及將其從細胞培養實驗室所用試劑中去除都十分困難.由於大多數病毒對宿主有非常嚴格的要求,因此一般不會對與其宿主物種不同的細胞培養物造成不良影響.但是,使用病毒感染的細胞培養物時卻會對實驗室工作人員造成嚴重的健康威脅,特別是當實驗室培養的是人或靈長類動物細胞時.通過電子顯微鏡檢查、一組抗體的免疫染色、ELISA實驗或者採用適當病毒引物的PCR技術可以檢測出細胞培養物的病毒污染.支原體是一種沒有細胞壁的簡單細菌,被認為是能夠自我復制的最小的生物.由於體積極小(般小於1微米),支原體的檢測十分困難,除非其達到極高的密度,導致細胞培養物變質,在此之前往往沒有明顯的感染徵象.有些生長緩慢的支原體可能會在培養物中持續存在,而不會導致細胞死亡,但是這些支原體會改變培養體系中宿主細胞的行為和代謝.慢性支原體感染的可能表現包括：細胞增殖速度降低、飽和密度下降以及懸浮培養物凝集；但是,唯一切實有效的檢測支原體污染的方法就是採用熒光染色(例如：Hoechst33258)、ELISA、PCR、免疫染色、放射自顯影或者微生物學測定技術定期檢測培養物.

㈡ 細胞培養污染，如圖，這到底是什麼污染真菌細菌

細菌污染會出現培養基混濁，細胞脫壁。真菌污染會出現懸浮物或菌絲體，培養基不混濁。看樣子象是真菌污染。

㈢ 細胞培養時為了防真菌污染需要加什麼樣的抗生素

通常用兩抄性黴素B (Fungizone)

兩性襲黴素B是一種對真菌有抗菌活性的抗生素。將其作為一種抗真菌、抗酵母菌以及抗黴菌制劑使用。它通過與固醇結合，干擾敏感真菌的細胞膜滲透性。通常的有效濃度是2.5μg/ml，在30μg/ml時有細胞毒性。

此外也可以選擇在培養基里加3u/ml的制黴菌素或放線菌素D。

真菌污染是個很麻煩的事，很難徹底消除，建議重新復甦細胞或從新分離或購買細胞。

在細胞培養中未見有用灰黃黴素的，用法與用量不詳。

㈣ 長滿的細胞懷疑有真菌污染，可以提蛋白做WESTERN嗎

Cells are full of suspected fungal contamination and can lift proteins

㈤ 細胞培養，常見的真菌污染源有哪些

細胞培養，常見的真菌污染源有哪些
培養基變渾濁的原因可能有如下幾點：
1、細胞存在污染，污染早期可以見到細胞生長；
2、不排除傳代時細胞密度過大，或者操作不當導致多數細胞不貼壁，大量細胞漂浮。
3、細胞破碎。

細胞培養中常見的生物污染類型有7種,分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細胞污染.他們在細胞培養中污染的特點如下：
1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯.
2、支原體：黑色的,好象多為多形,培養液一般培養液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一.而且它不能用過濾的辦法除去.支原體感染細胞以後,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去.
3、黑膠蟲：可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的.常常是細胞生長狀態良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象.對細胞生長狀態不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之後會自然消失,除更換血清外無須特殊處理.
4、真菌：一般培養液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物.真菌生長的比較慢,不象細菌那麼容易被發現,但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了.
5、原蟲：培養液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態不好,邊緣不清楚,細胞不透亮.他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養.這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環.
6.病毒：組織細胞培養過程中,如果沒有除去潛在的病毒,就會產生病毒污染.目前,從原代猴腎細胞的培養中已發現不少於20種血清性病毒.盡管病毒污染的細胞不影響原代培養,但生產疫苗是不安全的.因此,潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物製品製作中的難題 。
7、非同種細胞污染 ：即是細胞交叉污染,由於細胞培養操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,往往會使一種細胞被另一種細胞污染.目前,世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染,致使許多實驗宣告無效.非細胞培養物所造成的化學成分的污染也偶有發生,大多是由於細胞培養所需物品清洗消毒不徹底而帶入一些有毒化學物質所致.

㈥ 細胞真菌污染了，怎麼辦

1、細胞存在污染，污染早期可以見到細胞生長；
2、不排除傳代時細胞密度過大，或者操作不當導致多數細胞不貼壁，大量細胞漂浮。
3、細胞破碎。

細胞培養中常見的生物污染類型有7種,分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細胞污染.他們在細胞培養中污染的特點如下：
1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯.
2、支原體：黑色的,好象多為多形,培養液一般培養液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一.而且它不能用過濾的辦法除去.支原體感染細胞以後,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去.
3、黑膠蟲：可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的.常常是細胞生長狀態良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象.對細胞生長狀態不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之後會自然消失,除更換血清外無須特殊處理.
4、真菌：一般培養液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物.真菌生長的比較慢,不象細菌那麼容易被發現,但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了.
5、原蟲：培養液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態不好,邊緣不清楚,細胞不透亮.他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養.這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環.
6.病毒：組織細胞培養過程中,如果沒有除去潛在的病毒,就會產生病毒污染.目前,從原代猴腎細胞的培養中已發現不少於20種血清性病毒.盡管病毒污染的細胞不影響原代培養,但生產疫苗是不安全的.因此,潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物製品製作中的難題 。
7、非同種細胞污染 ：即是細胞交叉污染,由於細胞培養操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,往往會使一種細胞被另一種細胞污染.目前,世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染,致使許多實驗宣告無效.非細胞培養物所造成的化學成分的污染也偶有發生,大多是由於細胞培養所需物品清洗消毒不徹底而帶入一些有毒化學物質所致.

㈦ 細胞培養時怎樣防止真菌污染

無菌操作一步都不能含糊，一旦真菌感染，所用的器皿，試劑全部更換，培養箱徹底清理

㈧ 培養的細胞疑似被真菌污染

你加入雙抗復肯定是沒有制用的，雙抗僅僅是針對細菌而不是真菌。如果你實在不能重新復甦新的細胞來培養的話，建議你在培養基中使用兩性黴素。可以抑制真菌的生長，這樣通過不停地傳代稀釋後，可能會去除真菌的污染（不是絕對的）。
此外，如果你的培養的細胞中的真菌是在細胞培養瓶的局部而且你是用的是玻璃培養瓶，你可以考慮把可以看到真菌的那個部位在火焰上烤幾秒鍾，可以燒死真菌，也會死掉一部分細胞。
以上的辦法確實是無奈之舉，追好的辦法，還是你換新的細胞吧。
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㈨ 求問養細胞時，被細菌、真菌污染了怎麼檢測啊

細菌、真來菌污染常在傳代源、換液、加樣等開放性操作之後發生，而且增生迅速，若有污染，在48小時內可明顯觀察到，例如培養液變混濁，或略加振盪有很多漂浮物漂起。
(2)鏡下觀察
在倒置顯微鏡的高倍鏡下可見培養液中有大量圓球狀顆粒漂浮，即為細菌污染。若細胞之間有絲狀、管狀、樹枝狀或卵形的物質常為真菌污染。
採用普通肉湯接種或用未加雙抗葯物的培養液接種，也可發現是否有污染。

㈩ 細胞培養時為了防真菌污染需要加什麼樣的抗生素

通常用兩性黴素B (Fungizone)
兩性黴素B是一種對真菌有抗菌活性的抗生素.將其作為一種抗真菌、抗酵母菌以及抗黴菌制劑使用.它通過與固醇結合,干擾敏感真菌的細胞膜滲透性.通常的有效濃度是2.5μg/ml,在30μg/ml時有細胞毒性.
此外也可以選擇在培養基里加3u/ml的制黴菌素或放線菌素D.
真菌污染是個很麻煩的事,很難徹底消除,建議重新復甦細胞或從新分離或購買細胞.
在細胞培養中未見有用灰黃黴素的,用法與用量不詳.