當前位置:首頁 » 公共衛生 » dna污染

dna污染

發布時間: 2020-11-22 12:32:18

㈠ 如何預防PCR實驗的DNA污染

PCR實驗防止污染的方法:
進行PCR操作時,操作人員應該嚴格遵守一些操作規程,最大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。
劃分操作區:目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實現完全閉管操作,但無論是否能夠達到單人單管,均要求實驗操作在三個不同的區域內進行,PCR的前處理和後處理要在不同的隔離區內進行:
1. 試劑准備區。
2.標本制備區。
3. PCR擴增區及分析區。
切記:任何一間的產物及器材不要拿到其他兩個工作區。
分裝試劑:PCR擴增所需要的試劑均應在生物安全櫃、裝有紫外燈的超凈工作台或負壓工作台配製和分裝。所有的加樣器和吸頭需固定放於其中,不能用來吸取擴增後的DNA和其他來源的DNA:
1.PCR用水應為高壓的雙蒸水;
2.引物和dNTP用高壓的雙蒸水在無PCR擴增產物區配製;
3.引物和dNTP應分裝儲存,分裝時應標明時間,以備發生污染時查找原因。
實驗操作注意事項
盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進行擴增反應是謹慎認真,在樣品的收集、抽提和擴增的所有環節都應該注意:
1. 戴一次性手套,若不小心濺上反應液,立即更換手套;
2. 使用一次性吸頭,嚴禁與PCR產物分析室的吸頭混用,吸頭不要長時間暴露於空氣中,避免氣溶膠的污染;
3. 避免反應液飛濺,打開反應管時為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體於管底。若不小心濺到手套或桌面上,應立刻更換手套並用稀酸擦拭桌面;
4. 操作多份樣品時,制備反應混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然後分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應的精確度;
5. 最後加入反應模板,加入後蓋緊反應管;
6. 操作時設立陰陽性對照和空白對照,即可驗證PCR反應的可靠性,又可以協助判斷擴增系統的可信性;
7. 盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由於加樣器最容易受產物氣溶膠或標本DNA的污染,最好使用可替換或高壓處理的加樣器。如沒有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過程中加樣器應該專用,不能交叉使用,尤其是PCR產物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區;
8. 重復實驗,驗證結果,慎下結論

㈡ 被污染的樣本可以做DNA嗎

從技術上,微量的或者污染的DNA(極端或者特殊情況不包括在內)是可以得到數據的,比如在刑偵等事件上。但對於我們普通的運用,DNA樣本就要保證准確無污染,如果不符合條件就有做不出來的可能(要麼做不出來,但是不存在錯誤的情況),如果提供不符合常規樣本的特殊樣本,那麼在收費等方面可能就會有很大的差別,具體應咨詢鑒定機構

㈢ 什麼是基因組DNA污染

什麼是基因組DNA污染
基因組,Genome,一個細胞或者生物體所攜帶的一套完整的單倍體版序列,權包括全套基因和間隔序列。
可是基因組測序的結果發現基因編碼序列只佔整個基因組序列的很小一部分。因此,基因組應該指單倍體細胞中包括編碼序列和非編碼序列在內的全部DNA分子。說的更確切些,核基因組是單倍體細胞核內的全部 DNA分子。線粒體基因組則是一個線粒體所包含的全部DNA分子。葉綠體基因組則是一個葉綠體所包含的全部DNA分子。

㈣ 如何去除RNA中的DNA污染

這個如果你做反轉錄的話,只能是用PCR檢測了。電泳基本檢測不出來。象現在的試劑盒或者TRIZOL提的RNA,除質量太差,一般含基因組很少。 如果RT-PCR發現結果不對,可以用那種不含RNA酶的DNA酶處理一下。 如果引物能避開的話,有點DNA也沒關系。

㈤ 進行紫外線照射可以除去dna污染嗎

紫外線主要是通過對微生物(細菌、病毒、芽孢等病原體)
的輻射損傷和破壞核酸的功內能使微生物致死,從容而達到消毒的目的。紫外線對核酸的作用可導致鍵和鏈的斷裂、股間交聯和形成光化產物等,從而改變了DNA的生物活性,使微生物自身不能復制,這種紫外線損傷也是致死性損傷。所以要防止DNA對qPCR的污染,除了是去除環境微生物,另外要注意1、氣溶膠;2.實驗過程中各種耗材對待測樣本的接觸污染。

㈥ 什麼是基因污染

基因污染已經抄越來越受到人類襲的重視,被視為非常恐怖的污染。什麼是基因污染呢?就是指一些未知的外源基因通過轉基因作物或家養的動物,擴散到栽培作物或野生物種,然後成為後者基因的一部分,這種現象稱為基因污染。

基因污染主要是由基因重組引起的。一旦出現基因污染,將很難改觀,甚至會越來越嚴重。基因工程作物中的轉基因能通過花粉所進行的有性生殖過程擴散到其他的同類作物上,這種過程稱為「基因漂散」。

㈦ 為什麼我提的RNA總有DNA污染

如果污染基因組DNA的話,
由於基因組DNA分子量大,電泳特別慢,
因此通常會在加樣孔周圍看到EB強染信號.

㈧ 如果提取的質粒DNA污染有少量染色體DNA,你們在操作過程中哪既不最可能出現問題

.

加入裂解液的時候顛倒混勻的動作幅度太大,
會導致基因組DNA斷裂成小片段,和質粒混在版一起。

沉澱以後,吸取上清液權的時候不小心吸入沉澱,
會把夾在沉澱中的基因組DNA也一起吸入硅膠吸附柱,
這一步的可能性更大,通常都是這一步混入的基因組DNA。

.

㈨ 如何預防PCR實驗的DNA污染

首先,rna不能用於pcr擴增的模板,因此有rna污染的dna不會影響擴增;其次,rt-pcr指的是從rna反轉錄成dna再進行擴增的過程,因此,不存在rna污染dna的說法,只有後者污染前者的說法。

㈩ 如何在RTPCR過程中避免DNA污染

首先,從引物設計上避免基因組DNA的擴展,設計引物的時候擴展的區域在兩個不同專的外顯子上,這樣的屬話中間有一個內含子,如果PCR擴增的時候將基因組DNA也擴增出來的話,電泳條帶長度會比目地帶長
另外,提取好RNA之後,可以加入DNA酶進行消化,這樣可以消除RNA模板中的基因組DNA污染,TAKARA公司有賣的.
做到以上兩點基本可以保證沒有基因組DNA的干擾了

熱點內容
影視轉載限制分鍾 發布:2024-08-19 09:13:14 瀏覽:319
韓國電影傷口上紋身找心裡輔導 發布:2024-08-19 09:07:27 瀏覽:156
韓國電影集合3小時 發布:2024-08-19 08:36:11 瀏覽:783
有母乳場景的電影 發布:2024-08-19 08:32:55 瀏覽:451
我准備再看一場電影英語 發布:2024-08-19 08:14:08 瀏覽:996
奧迪a8電影叫什麼三個女救人 發布:2024-08-19 07:56:14 瀏覽:513
邱淑芬風月片全部 發布:2024-08-19 07:53:22 瀏覽:341
善良媽媽的朋友李采潭 發布:2024-08-19 07:33:09 瀏覽:760
哪裡還可以看查理九世 發布:2024-08-19 07:29:07 瀏覽:143
看電影需要多少幀數 發布:2024-08-19 07:23:14 瀏覽:121