污染提取

㈠ 有什麼辦法可以從重金屬污染的土壤中把重金屬提取出來，謝謝！

土壤條件與重金屬的遷移轉化
不同土壤條件下(土壤類型、土地利用方式、土壤物化性狀、酸鹼性、氧化––還原、吸附、絡合)的影響，可引起土壤中重金屬元素存在形態的差異，從而影響重金屬的遷移和作物對重金屬的吸收。
(1)氧化–––還原條件。土壤的這一體系是一個由眾多無機和有機的單項氧化–––還原體系組成的復雜體系。
無機體系：O2、Fe、S、H2體系，由決定電位體系控制，其中O2–H2O體系和硫體、H2體系作用明顯，對重金屬元素價態變化起重要作用。
①O2–H2O體系：
25℃時，Eh=1.23+0.015lgPo2-0.059pH
②H2體系，旱地土壤中少見，淹水狀態下，為還原強烈的土層中：有H2積累
25℃時，Eh=0.059pH
以上兩體系為土壤氧化––還原體系的兩個極端，土壤中其他體系介於二者之間。所以這兩個體系為上限和下限。
重金屬元素按其性質分為氧化難溶性(氧化固定元素–––Fe3+、Mn4+等，和還原難溶性(還原固定)元素––Cd、Cu、Zn、Cr等(Cd、Zn、Cu、Pb、Ni等生成難溶性化物沉澱)。
在水中：
另外，氧化還原條件的改變，還原使重金屬的毒性發生變化，如Cr3+氧化條件下成為Cr6+，其毒性大於Cr3+；As在還原條件下生成亞砷酸，毒性大於砷酸。

㈡ 怎樣避免質粒提取基因組DNA污染

1. 加溶液2後不要來劇烈搖晃，溶液2處理源時間不能太久，一般顛倒6-8次即加溶液3中和，這都是為了避免鹼裂解基因組；

2. 加溶液3後要混合充分，離心後取上清小心不要吸到白色沉澱，那裡有組蛋白包著的基因組DNA。

脫氧核糖核酸（英語：Deoxyribonucleic acid，縮寫為DNA）又稱去氧核糖核酸，是一種分子，雙鏈結構，由脫氧核糖核苷酸（成分為：脫氧核糖及四種含氮鹼基）組成。可組成遺傳指令，引導生物發育與生命機能運作。

主要功能是長期性的資訊儲存，可比喻為「藍圖」或「食譜」。其中包含的指令，是建構細胞內其他的化合物，如蛋白質與RNA所需。

帶有遺傳訊息的DNA片段稱為基因，其他的DNA序列，有些直接以自身構造發揮作用，有些則參與調控遺傳訊息的表現。

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㈢ RNA提取過程中如何去除DNA污染

方法：
1、使用DNA酶DNAse I 消化1小時，恆溫37度。
2、離心取上清的時候，一定要小心不要取到中間的膜和下面的液體。
3、直接加NaOH溶液與提取液混合攪拌,然後離心就可以了.因為RNA可溶於NaOH溶液,而DNA不可溶,離心後的上清液就不含有DNA了。

㈣ 怎麼樣在RNA提取時避免基因組的污染

260/280的比值可以復判斷比較嚴重製的基因組污染。
也可以通過跑瓊脂糖膠看加樣孔里亮不亮作為一個參考依據。
其實一般很難保證RNA沒有基因組污染的，特別是加入氯仿後的劇烈震盪會促進dna溶解到水相里，後面就很難分離了。
有些許的基因組污染的樣品也能夠滿足大部分的實驗要求。
所以在rt-pcr等試驗中才要求設計的引物要跨intron，這樣就可以區分擴增產物的模板來自於mRNA還是基因組dna

㈤ TRIzol法提取RNA如何避免DNA污染

植物RNA本來就比價難提取,TRIzol提取時裂解要充分 劇烈震盪,分層靜置,離心之後版自然就分為兩層,取RNA層的時權候吸取一定要小心,吸得時候一定要緩慢,不要怕浪費,有的人吸得很多,很怕浪費,結果就吸到了中間層和下層,個人覺得吸取80%最多了,再多就很容易吸到雜質了,操作要小心,動作快速准卻,這樣才能提到高質量的RNA

㈥ 試劑盒提取dna,rna污染

僅僅260/280大於1.9並不能說明有RNA污染，1.8到2.0之間應該都是正常的。要確定有沒有RNA污染，可以跑膠檢測，污染的RNA會形成一個拖帶。不放心可以加一點RNA酶。

㈦ 大家好！請教大家一件事：本人想從有毒污染水中提取蒸餾水（煮沸蒸發後）作為飲用水，請問蒸餾水還會有毒

這不好說，要看污染物的性質，如果是重金屬鹽，過濾是沒用的，但蒸餾可以。如內果殘留容苯，硝基苯這類有機物，過濾，蒸餾恐怕都夠嗆，可以試試活性炭吸附。如果是水裡有放射性輻射殘留，那就沒有必要蒸餾或過濾了，因為放射性污染在你接近污染源的時候就已經在危害你了。
另外，「有輻射」，這種說法恐怕是民間用語，專業人士一般具體說「放射性輻射」、「電磁波輻射」等更為准確的說法。

㈧ 提取RNA時如何去除DNA的污染

提取RNA時如何去除DNA的污染的方法：

1. 注意實驗室的標准化問題，注意污染的存在，同時嚴格按照說明書上的操作應該沒有

2. 問題。發現DNA污染，用DNAse I 消化1小時，37度

3. 離心取上清的時候，一定要小心不要取到中間的膜和下面的液體。

4. 直接加NaOH溶液與提取液混合攪拌,然後離心就可以了.因為RNA可溶於NaOH溶液,而DNA不可溶,離心後的上清液就不含有DNA了。

RNA提取步驟：

1. 勻漿處理：

①組織 將組織在液氮中磨碎，每50-100mg組織加入1ml TRIzol，用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10%。

②單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決於細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。

③細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。

2. 將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鍾，使核酸蛋白復合物完全分離。

3. 可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可於2-8℃10000×g離心10分鍾，取上清。離心得到的沉澱中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。

4. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，劇烈振盪15秒，室溫放置3分鍾。

5. 2-8℃10000×g離心15分鍾。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60%。

6. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見後。用異丙醇沉澱水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鍾。

7. 2-8℃10000×g離心10分鍾，離心前看不出RNA沉澱，離心後在管側和管底出現膠狀沉澱。移去上清。

8. 用75%乙醇洗滌RNA沉澱。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75%乙醇。2-8℃不超過7500×g離心5分鍾，棄上清。

9. 室溫放置乾燥或真空抽干RNA沉澱，大約晾5-10分鍾即可。不要真空離心乾燥，過於乾燥會導致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl無RNase的水或0.5%SDS，用槍頭吸打幾次，55-60℃放置10分鍾使RNA溶解。如RNA用於酶切反應，勿使用SDS溶液。RNA也可用100%的去離子甲醯胺溶解，-70℃保存。

注意事項：

1. 從少量樣品（1-10mg組織或102-104細胞）中提取RNA時可加入少許糖原以促進RNA沉澱。例如加800ml TRIzol勻漿樣品，沉澱RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原會與RNA一同沉澱出來，糖原濃度不高於4mg/ml是不影響第一鏈的合成，也不影響PCR反應。

2. 勻漿後加氯仿之前樣品可以在-60至-70℃保存至少一個月。RNA沉澱可以保存於75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。

3. 分層和RNA沉澱時也可使用台式離心機，2600×g離心30-60分鍾。

   預期產量：1mg組織或1×106細胞提取RNA分別為：

   肝和脾6-10μg，腎3-4μg，骨骼肌和腦組織1-1.5μg，胎盤1-4μg，上皮細胞8-15μg，成纖維細胞5-7μg 。

㈨ 花粉液提取過程對環境有污染嗎

污染還是相對較小的。但是提取後的清洗，殘渣，人工生活的污水還是要考慮的。具體看規模，看地域要求。

㈩ RNA提取過程中如何去除DNA污染

直接加NaOH溶液與提取液混合攪拌，然後離心就可以了。因為RNA可溶於NaOH溶液，而DNA不可溶，離心後的上清液就不含有DNA了。