細胞箱污染
㈠ 細胞污染,求大神鑒定是什麼污染,細菌
你在細胞傳代過程中一定要注意細節,操作台擦拭乾凈消毒好。這樣書可以避專免再污屬染的。帶刺毛毛蟲(站內聯系TA)像葡萄球菌污染,真菌是小塊的,散在的,有出芽的現象。我看是細胞不能要了ifyousee(站內聯系TA)hela細胞都是很廉價的細胞系了,把細胞培養所用的培養液、PBS(D-hanks)、胰酶等等都換掉吧。 建議細胞培養環境、細胞培養箱、培養用具都徹底清洗消毒一下 覺得細胞很重要可以加兩性黴素B處理一下,不重要的話直接重新復甦或是重新要新的細胞系就可以了司徒皮皮蝦(站內聯系TA)這個應該是真菌污染,一旦污染了之後就會一夜暴漲,影響細胞的正常生長,應盡快丟掉污染的培養瓶,然後做排查實驗,如果是大面積污染的話很有可能是細胞培養液和移液槍有污染。移液槍的槍體裡面是紫外照射不到的,所以要注意移液槍是否污染過。
㈡ 細胞污染了,會不會影響培養箱里的其他細胞啊
Airare(站內聯系TA)有的時候也遇到過,馬上把污染細胞扔得遠遠的,其他的還好。版嚴重了就要徹底消毒了:sweat:xboy666(站內權聯系TA)主要看你是什麼菌污染了,依照你說的看應該沒什麼事。最好再觀察下,最好還是別擦培養箱,因為有些細胞對酒精敏感。chao(站內聯系TA)這個問題不大,只要把你污染的細胞拿走就行。然後酒精消毒。zgrjhh(站內聯系TA)一般沒事,可能是真菌感染。擦拭一下培養箱zitaoguo(站內聯系TA)應該問題不大,不用擔心。silicare(站內聯系TA)真菌污染是個大杯具,孢子擴散能力極強,需要徹底擦拭培養箱和細胞間,其他細胞注意觀察,有條件的話加兩性黴素Bcafulover(站內聯系TA)應該沒事。最好用酒精棉球把培養箱內部擦一遍,把插板用紫外照一下。
㈢ 細胞污染為什麼會影響其它孵箱中的細胞
細胞污染為什麼會影響其它孵箱中的細胞
只要溫度、濕度調節合適,內對細菌生長是沒有容影響的。但是,我們一般不這樣做,因為實驗室專器專用,這個培養箱培養過細菌後,再用來培養細胞時就會因殘留的細菌造成污染,雖然可能同時採取了其他滅菌、防菌措施,但污染的概率還是極大的,因而不能用來培養細胞了。
你可以隨機取樣,在油鏡下觀察細胞表面和細胞之間有無暗色微小顆粒,或者用專門檢測支原體的試劑盒檢測一下有沒支原體.
如果要預防,往培養基里加適量四環素類、大環內酯類、某些氟喹諾酮類、M-Plasmocin抗生素可以預防.
培養箱中噴灑支原體抑制劑(換句話說就是用含抗生素的消毒劑或水擦培養箱和其它細胞培養板的表面).如果實在不放心,那就在其它細胞的培養基中加抗生素預防.
㈣ 怎麼知道培養箱里有沒有被污染
如果是培養箱污染的話,最明顯的表現是放在裡面的細胞都有可能會莫名其妙的污染。
如果專想確定是屬不是培養箱污染了,我們的做法是:取1~2個空氣培養皿,放入培養箱中,然後送細菌室做細胞培養及鑒定,看看是否有菌及是什麼菌。
天#貓美國進口普衛欣提示:霧霾天氣出行記得做好防護。
㈤ 細胞污染怎麼辦
要看是什麼污染,如果是支原體污染,一般肉眼觀察不到。支原體感染發生後能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,它對細胞的生長率影響較小。可以通過間接免疫熒光法,免疫印跡和PCR技術快速高效地檢測到。
如果細菌污染,那挽回的可能性很小。因為細菌比細胞生長的要快,需要的生長條件也沒那麼高的要求。如果輕微的污染可以通過加入高濃度(正常的10倍)抗生素的培養基反復洗細胞,有可能清除。如果是杭州的可以咨詢浙江波因醫葯科技有限公司,可以提供這方面的技術服務
㈥ 為什麼我的細胞培養的時間一長,就會出現污染
樓主的細胞是被蟲子污染。你平時應該經常有觀察,總是在半個月就出蟲?是蟲,專不是污染的細胞?板使屬用之前先照紫外光看看,照2小時應該能殺蟲卵。整個實驗室是否徹底消毒過,如果別人也是這樣的情況,就消毒一下。另外培養箱要徹底消毒。還有注意放置的位置。培養箱里也會出現交叉污染。不知道你是不是和別人共用培養箱,如果有別的比較強悍的細胞也放在培養箱里,你要把自己的細胞放在那些細胞的上層,最強悍的細胞就放到一樓,最弱的細胞放頂樓。
另外,建議去訂一批新的板。
㈦ 細胞蓋子不小心在細胞溫箱中打開了會污染嗎
【推薦】胚胎幹細胞培養標准化操作規程胚胎幹細胞培養標准化操作規程 6/28/01
目錄
一、細胞
二、一般培養-保持胚胎幹細胞處於未分化狀態
培養基
細胞復甦
凍存細胞
明膠包被
細胞傳代
三、體外分化
培養基
包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或不使用蓋玻片)
體外分化方法
四、移植細胞的准備
細胞
多能性胚胎幹細胞產生於小鼠胚泡
1.表達綠色熒光蛋白(EGFP)的B5-ES細胞.由Dr. Nagy的實驗室制備.
2.D3-ATCC; CRL-1934. 我們得到時大約傳了17代.
3.J1-由Dr. Jaenish的實驗室友情提供.我們得到時大約傳了7-9代.
4.J1rtTA-rtTA表達J1細胞,由Dr. Jaenish的實驗室友情提供.
5.表達黃色熒光蛋白的YC5-ES細胞,由Dr. Nagy的實驗室提供.
一般培養--維持ES細胞處於未分化狀態
ES細胞培養用含有ESGRO(白血病抑制因子)的高糖培養基來阻止細胞的分化.為細胞提供包被有0.1%明膠的平板作為粘附細胞的基質.建議每2-3天從達到80%-90%融合的平板按1:8的比率傳代細胞一次,細胞傳代以後,在將細胞接種在0.1%明膠包被的培養皿之前,通過預先將細胞接種在沒有經過包被的組織培養板2個小時,使分化細胞粘附,從而將分化和未分化細胞分開.將細胞全程置於37℃,5%CO2,100%濕度條件下培養.
培養基
ES:
配製一20×不含DMEM,HS,ESGRO的溶液(該溶液也能用於EB培養基--見下文).分裝在50ml FALCON管中,(稀釋為2×,每管42ml),貯存在-20℃.通過將21ml該溶液,HS和ESGRO加入450mlDMEM中制備培養基,0.2μm濾膜過濾.貯存於4℃. 註:一瓶DMEM是500ml.
貯存液
DMEM(高糖)
馬血清(HS)
L-谷氨醯胺(200mM)
MEM NEAA(10mM)
HEPES(1M)
β-巰基乙醇(55Mm)
PEST
ESGRO
復甦細胞
細胞被凍存在10%二甲基亞碸(DMSO)中防止結晶的形成,結晶的形成會損害細胞.然而,二甲基亞碸對細胞有毒性,快速的進行細胞復甦是很重要的.
步驟:
1.從液氮中取出一管細胞;
2.將凍存管置於37℃水浴中2分鍾(或放到管內溶液恰好完全溶解);
3.將細胞轉移到一15ml Falcon管中;
4.加入5ml ES培養基(用培養基沖洗凍存管);
5.離心3分鍾;
6.棄上清,用2ml ES培養基重懸細胞,至少吹打10次;
7.接種在明膠包被(見下文)的6孔或6cm組織培養皿;
8.孵育.
凍存細胞
凍存液
90%HS和10%二甲基亞碸
步驟:
1.1×PBS洗細胞並留少許PBS在培養皿內;
2.用細胞刮刀收集細胞;
3.將細胞轉入15ml Falcon管內並離心3分鍾;
4.棄去上清並將細胞重懸於冷的凍存液中(10cm的培養皿用2ml,15cm的培養皿用6-7ml.)
5.分裝於凍存管內,每管1ml;
6.置-80℃過夜,第二天移入液氮.
明膠包被
准備500ml 0.1%明膠溶液
1.將0.5g明膠溶解在500ml無鈣鎂的PBS中(50-65℃水浴15~30分鍾).
2.最好在溶液沒有冷卻的情況下通過0.2μm濾膜過濾,貯存在4℃.
包被培養板或培養皿
1.加入足量的明膠溶液覆蓋培養平面(15cm培養皿加2ml,10cm培養皿加0.5~1ml,溶液的量並不重要,只要能完全覆蓋培養表面就行了.);
2.置室溫30分鍾;
3.去除明膠溶液,將培養板貯存在包裝袋中室溫放置,最好將板子平方,以免明膠污染蓋子和流出培養板.
細胞傳代
建議每2-3天傳代細胞一次,過度生長的細胞會降低細胞的自然分化率,我們建立了一種純化方法來去除分化細胞,在將細胞接種在明膠包被的培養板上之前,通過將分化細胞黏附在沒有包被的組織培養板上去除分化細胞.純化步驟包含在下面的方法中.
1.去除培養液;
2.1×無鈣鎂PBS洗滌;
3.加入1×胰酶EDTA(10×胰酶EDTA用PBS稀釋.)37℃孵育5分鍾.
4.加入ES培養基使胰酶失活;
5.將細胞轉入15ml離心管中離心3min;
6.去除上清,將細胞重懸於2mlES培養基,至少吹打10-20次.
如果加入培養基的量較少會比較容易將細胞團弄散分開.ES細胞有聚集成團的傾向,傳代過程中仔細將細胞弄散分開很重要.這樣可能會減少細胞的自然分化.
7.將細胞接種在沒有包被的組織培養皿中(使用和一開始同樣規格的培養皿)放入溫箱2小時(分化細胞在該時間內將黏附,而ES細胞仍將保持懸浮);
8.將含有細胞的培養基轉入明膠包被(見下文)的組織培養皿.吹打以確保細胞被分散開(前面已經提到--ES細胞有聚集成團的傾向)
9.建議按1:4-1:10的比率傳代(ATCC)
保持細胞的傳代比率很重要,以我們的經驗,1:8的比率是好的,可以使細胞的自然分化降到最低.當你使用不同規格的培養板進行細胞傳代可以使用表1來計算傳代比率.
體外分化
多能胚胎幹細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞.我們的體外分化方法有利於神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存在的情況下擴增(第4步)並最終分化在第5步.細胞全程培養在37℃,5%CO2,100%濕度條件下.
時間線(總時間為27~34天)
第2步;4+1天 第3步;4-10天 第4步;4天 第5步;10-15天
培養基
EB
配製一20×不含DMEM,FBS,ESGRO的溶液(該溶液也能用於ES培養基--見前述).分裝在50ml FALCON管中,(稀釋為2×,每管42ml),貯存在-20℃.將21ml該溶液和50ml FBS加入450mlDMEM中制備培養基,0.2μm濾膜過濾.貯存於4℃. 註:一瓶DMEM是500ml.
貯存液
DMEM(高糖)
胎牛血清
L-谷氨醯胺(200mM)
MEM NEAA(10mM)
HEPES(1M)
β-巰基乙醇(55Mm)
PEST(P104U/mlS104μg/ml
ITSFn and N3:
配製一20×不含DMEM/F12的溶液.分裝在15ml FALCON管中,(稀釋為1×,ITSFn 7.05ml,N3 12.55ml),0.2μm濾膜過濾,貯存在-20℃.將該溶液加入DMEM/F12中制備培養基,貯存於4℃.
貯存液
DMEM(高糖)
轉鐵蛋白50mg/ml
胰島素5mg/ml
亞硒酸鈉300μM
黃體酮(20μM)
腐胺(100μM)
PEST(P104U/ml S104μg/ml)
層粘連蛋白100μg/ml
纖維連接蛋白250μg/ml
鹼性rhFGF, 10μg/ml
*在第4步將bFGF加入N3培養基使終濃度為10ng/ml.
ITSFn and N3培養基貯存液的准備
使用無菌的溶劑和稀釋液,在分裝之前要對溶液進行過濾,如果因為某些原因溶液在分裝之前沒有進行過濾,需要在管子上標明以便別人在使用時知道該溶液不能直接用於細胞培養.
貯存液 溶劑,貯存液,稀釋劑和儲存
轉鐵蛋白50mg/ml
胰島素5mg/ml
亞硒酸鈉300μM
黃體酮(20μM)
腐胺(100μM)
PEST(P104U/ml S104μg/ml)
層粘連蛋白(100μg/ml)
纖維連接蛋白(250μg/ml )
鹼性rhFGF, (10μg/ml)
包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或不使用蓋玻片)
包被液的准備
多聚-L-鳥氨酸,15μg/ml
把75ml多聚-L-鳥氨酸和425ml 1×PBS混合.貯存在4℃.
纖維結合蛋白,1μg/ml
把0.5ml纖維結合蛋白和500ml 1×PBS混合.
包被過程:
1.加入多聚-L-鳥氨酸,至少2-3小時(過夜也行)
2.吸出多聚-L-鳥氨酸
3.加入纖維結合蛋白,大約1-2小時
4.吸出纖維結合蛋白,放置30分鍾晾乾
5.貯存在4℃
24孔板用200μl,6孔板用500μl.震盪培養板確保溶液能夠覆蓋蓋玻片或培養孔.有時需要劇烈震盪培養板.
體外分化方法
第1步:ES培養基
在LIF(ESGRO)存在的條件下維持細胞培養
第2步:EB培養基
使用細菌培養皿去除LIF後胚狀體的形成需要4天.
1.分散純化細胞(參見上面的細胞傳代部分)
2.純化2小時後將細胞轉入含有ES培養基的50ml Falcon管中,計數細胞取適量體積放入15ml管中離心3分鍾.
3.用2mlEB培養基重懸細胞,吹打至少10次製成單細胞懸液
4.一個15cm的細菌培養皿接種4~5×106個細胞(1個完全融合的組織培養皿通常足以接種4個同樣規格的細菌培養皿).
5.2天後更換培養基
將胚狀體轉入錐形管中放置3~5分鍾使細胞沉降.棄去上清,將細胞重懸於新鮮培養基並接種在新的細菌培養皿中.
6.用EB培養基培養的第4天將細胞轉入沒有包被的組織培養皿中(這即是細胞的移植步驟).1個組織培養皿之中放置1個細菌培養皿,在進行第3步之前一天將胚狀體黏附在同樣規格的培養板上.
形成胚狀體需要4天時間.在EB培養基中再培養1天使胚狀體粘附在組織培養皿的表面.這一天被認為是第2步和第3步的分界.
第3步--ITSFn培養基
在最少量培養基中選擇神經前體細胞
1.在胚狀體接種在組織培養皿一天後將培養基換成ITSFn培養基
2.並非所有胚狀體在這一時期都已經發生粘附,因此在移除培養基時要小心謹慎以使大部分胚狀體留在培養皿內.
3.保持細胞在ITSFn中培養大約10天,根據需要更換培養基--大約每隔一天.
觀察細胞形態,神經樣細胞大約出現在第4到第7天.當神經樣細胞能夠被鑒別時,轉入到第4步.步驟的轉換應該在神經前體細胞出現第一個清晰的標志幾天以後,通常是在第3步的第6到第10天.
第4步-N3培養基+bFGF
通過將神經前體細胞培養在含有10ng/ml bFGF的培養基中進行擴增.
1.PBS洗滌,加入2ml 1×胰酶(1個15cm的培養皿所需胰酶的量根據前文表中的體積)(10×胰酶EDTA用PBS稀釋)
2.37℃孵育5分鍾
3.用4mlEB培養基終止胰酶活性,將細胞轉入錐形管中放置3~5分鍾移出細胞團,將上清移入一新的離心管離心.
4.將細胞重懸於含有bFGF的N3培養基.
5.將細胞接種在包被多聚-L-鳥氨酸/纖維連接蛋白的蓋玻片上(最好將蓋玻片放於24孔培養板或6孔培養板,6孔培養板中每孔放置5個蓋玻片如果是塑料的放置4個,以使最大可能的獲得樣品數量).24孔板接種3.5×105/孔或6孔板1.7×106/孔.
6.2天後更換培養基
第5步-N3培養基
通過撤除bFGF使神經前體細胞分化
1.細胞被接種在蓋玻片上4天後將培養基換成不含bFGF的N3培養基
2.根據需要換液(大約每隔一天)
3.分化10~15天後固定細胞
移除培養基
PBS洗滌
加入4%福爾馬林
室溫放置30分鍾
PBS洗滌2次
儲存於PBS.長期儲存使用含0.01%疊氮化納的PBS
移植細胞的准備
細胞在胚狀體形成4天以後被移植(相應於體外分化過程中的第2步末細胞被轉種到組織培養板).正如在前文體外分化中所描述的在移植之前4天開始形成胚狀體.通常再需要一天時間以便將胚狀體移植入一10cm的培養皿.
移植
1.將胚狀體轉移至一15ml 圓錐形管中放置3~5分鍾使胚狀體沉降下來.
細胞被離心3分鍾會更好.放置使之沉降將會去除更多的單個細胞(包括死細胞)而這些細胞可以被離心下來.
2.去除上清將胚狀體重懸於無鈣鎂離子的1×PBS中
3.離心3分鍾
4.去除上清加入1×胰酶(10cm的培養皿加1ml)
5.37℃水浴5分鍾
6.加入5mlEB培養基小心吹打約10次
小心處理細胞很重要,進行細胞傳代分散細胞時不可劇烈吹打.
7.離心2分鍾
8.吸出上清將細胞重懸於500μl EB培養基
9.用光滑的巴斯德吸管小心吹打5次
10.離心2次
11.吸出上清將細胞重懸於100μl EB培養基
煙酸己可鹼標記ES細胞進行移植
1.准備一10μg/ml的煙酸已可鹼染液(雙苯醯亞胺,在冷凍室118)
2.加入1mg(你能稱到的最小量)到5ml EB培養基(製成200μg/ml)
3.將溶液稀釋成10μg/ml (100μl 200μg/ml 溶液和1.9ml EB培養基)
4.如前所述將細胞重懸於2ml煙酸已可鹼染液而不是EB培養基中制備ES細胞懸液,
5.將懸液置於室溫(或冰上)30分鍾
6.離心2分鍾
7.吸出上清將細胞重懸於2ml EB培養基
8.重復一次
9.離心2分鍾
10.吸出上清將細胞重懸於100μl EB培養基並置於冰上. 這是我最近翻譯的一篇有關胚胎幹細胞的文章,譯的不好,但是意思應該還算準確.不好意思,有兩個表格沒有發上,哪位老師告訴我該如何編輯表格.謝謝了! 謝謝,頂! 我也頂 很好的帖子哦!我查了好久終於找到了.萬分感謝! 謝謝,現在還沒用到,就當先了解一下好了.再次謝謝! 謝謝非常感謝 有原文嗎?
如果有可以發到我郵箱([email protected])嗎?謝謝! 好貼!
能將英文原文貼上嗎?或者發到我的信箱:[email protected]
謝謝! 不錯不錯,我這里發一些關於幹細胞的相關知識
幹細胞的概念
幹細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞.它包括胚胎幹細胞和成體幹細胞.幹細胞的發育受多種內在機制和微環境因素的影響.目前人類胚胎幹細胞已可成功地在體外培養.最新研究發現,成體幹細胞可以橫向分化為其他類型的細胞和組織,為幹細胞的廣泛應用提供了基礎.
在胚胎的發生發育中,單個受精卵可以分裂發育為多細胞的組織或器官.在成年動物中,正常的生理代謝或病理損傷也會引起組織或器官的修復再生.胚胎的分化形成和成年組織的再生是幹細胞進一步分化的結果.胚胎幹細胞是全能的,具有分化為幾乎全部組織和器官的能力.而成年組織或器官內的幹細胞一般認為具有組織特異性,只能分化成特定的細胞或組織.
然而,這個觀點目前受到了挑戰.
最新的研究表明,組織特異性幹細胞同樣具有分化成其他細胞或組織的潛能,這為幹細胞的應用開創了更廣泛的空間.
幹細胞具有自我更新能力(Self-renewing),能夠產生高度分化的功能細胞.幹細胞按照生存階段分為胚胎幹細胞和成體幹細胞 .
1.1 胚胎幹細胞
胚胎幹細胞(Embryonic Stem cell, ES細胞)
當受精卵分裂發育成囊胚時,內層細胞團(Inner Cell Mass)的細胞即為胚胎幹細胞.胚胎幹細胞具有全能性,可以自我更新並具有分化為體內所有組織的能力.早在1970年Martin Evans已從小鼠中分離出胚胎幹細胞並在體外進行培養.而人的胚胎幹細胞的體外培養直到最近才獲得成功.
進一步說,胚胎幹細胞(ES細胞)是一種高度未分化細胞.它具有發育的全能性,能分化出成體動物的所有組織和器官,包括生殖細胞.研究和利用ES細胞是當前生物工程領域的核心問題之一.ES細胞的研究可追溯到上世紀五十年代,由於畸胎瘤幹細胞(EC細胞)的發現開始了ES細胞的生物學研究歷程.
目前許多研究工作都是以小鼠ES細胞為研究對象展開的,如:德美醫學小組在去年成功的向試驗鼠體內移植了由ES細胞培養出的神經膠質細胞.此後,密蘇里的研究人員通過鼠胚細胞移植技術,使癱瘓的貓恢復了部分肢體活動能力.隨著ES細胞的研究日益深入,生命科學家對人類ES細胞的了解邁入了一個新的階段.在98年末,兩個研究小組成功的培養出人類ES細胞,保持了ES細胞分化為各種體細胞的全能性.這樣就使科學家利用人類ES細胞治療各種疾病成為可能.然而,人類ES 細胞的研究工作引起了全世界范圍內的很大爭議,出於社會倫理學方面的原因,有些國家甚至明令禁止進行人類ES細胞研究.無論從基礎研究角度來講還是從臨床應用方面來看,人類ES細胞帶給人類的益處遠遠大於在倫理方面可能造成的負面影響,因此要求展開人類ES細胞研究的呼聲也一浪高似一浪.天貓美國普衛欣提示:霧霾天氣出行記得做好防護。
1.2 成體幹細胞
成年動物的許多組織和器官,比如表皮和造血系統,具有修復和再生的能力.成體幹細胞在其中起著關鍵的作用.在特定條件下,成體幹細胞或者產生新的幹細胞,或者按一定的程序分化,形成新的功能細胞,從而使組織和器官保持生長和衰退的動態平衡.過去認為成體幹細胞主要包括上皮幹細胞和造血幹細胞.最近研究表明,以往認為不能再生的神經組織仍然包含神經幹細胞,說明成體幹細胞普遍存在,問題是如何尋找和分離各種組織特異性幹細胞.成體幹細胞經常位於特定的微環境中.微環境中的間質細胞能夠產生一系列生長因子或配體,與幹細胞相互作用,控制幹細胞的更新和分化.
1.3 造血干細
造血幹細胞是體內各種血細胞的唯一來源,它主要存在於骨髓、外周血、臍帶血中.今年年初,協和醫大血液學研究所的龐文新又在肌肉組織中發現了具有造血潛能的幹細胞.造血幹細胞的移植是治療血液系統疾病、先天性傳疾病以及多發性和轉移性惡性腫瘤疾病的最有效方法.
㈧ 細胞污染了,會不會影響培養箱里的其他細
主要看復你是什麼菌污染了,制依照你說的看應該沒什麼事。最好再觀察下,最好還是別擦培養箱,因為有些細胞對酒精敏感。chao(站內聯系TA)這個問題不大,只要把你污染的細胞拿走就行。然後酒精消毒。zgrjhh(站內聯系TA)一般沒事,可能是真菌感染。擦拭一下培養箱zitaoguo(站內聯系TA)應該問題不大,不用擔心。silicare(站內聯系TA)真菌污染是個大杯具,孢子擴散能力極強,需要徹底擦拭培養箱和細胞間,其他細胞注意觀察,有條件的話加兩性黴素Bcafulover(站內聯系TA)應該沒事。最好用酒精棉球把培養箱內部擦一遍,把插板用紫外照一下。
㈨ 在培養箱的細胞,別人的污染了,會影響我的嗎
最好在養細胞前消毒,揮發性的甲醛有毒。因為現在的孵箱都有抑菌功能,不放心的話再用高錳酸鉀加甲醛1,請慎用,然後再用0,濃度沒關系,味道很刺激的。 10:把平皿高壓滅菌後. 我的經驗是在補充水時最好把水加熱一下. 我們的方法比較簡單。注意要是熏的話千萬注意混合之後馬上離開,再照紫外就可以拉,然後用甲醛+高錳酸鉀熏蒸一個晚上,確實沒地方放細胞。 3. 熏蒸後吹一天是絕對不夠的. 常規最好什麼也不放.再加少量新潔爾滅。使用消毒劑應小心。 6。 9!注意周圍環境的清潔就不會那麼容易污染的拉,通風10分鍾,也有的帶有紫外線功能:1比例熏一遍. 有的培養箱能加熱內壁到90度、易爆,然後通風一整天(同時打開紫外線照射),易燃,培養箱內有檢測溫度,箱壁用75%酒精擦一遍! 2.1%的新潔爾滅擦洗,腐蝕性消毒劑或有機溶劑有可能損壞某些器件。另外,再紫外照一夜. 我們是把培養箱里的板層拿出來高壓一下。 5。 7!硫酸銅的作用是抑制細菌生長(但多數用在處理污染的孔板)。常規應該每周用酒精擦洗內部一次,達到培養箱的溫度,其他的請高手指教1,細胞會死光光哦(我實驗室的真實故事),要不細胞長不好的 8. 我們實驗室的做法,我們這里一般是用70%的乙醇擦洗,先用75%酒精擦拭內壁,再聯系技術支持。總之。具體的操作請參考培養箱的手冊:先用純水擦洗,最起碼要一個星期才可以讓甲醛散盡,效果很好,否則,換用詩樂氏擦一遍. 這么早就養細胞了,再用95的酒精擦洗. 我們的通常處理是先用75%的酒精擦拭內壁,先看培養箱手冊。 4,然後密閉細胞培養室。如果在培養箱內殘留甲醛的話,或著咨詢培養箱技術支持,在無菌操作台內加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水、濕度和二氧化碳濃度的感測器. 培養箱消毒,方可萬無一失啊,紫外線照射30分鍾即可.細胞養的都可以